高效液相色谱溶剂的在线混合-低压和高压混合
高效液相色谱法分析常用等分或梯度洗脱法。在等容模式下，流动相组成在分析运行期间保持不变，而在梯度洗脱中，流动相组成在运行期间按照定义的程序变化。
在前一篇文章中脱机混合溶剂进行了讨论。根据操作的选择，在高效液相色谱系统中进行进一步混合以获得所需的流动相组成。
等分法通常使用有机溶剂与水的混合物。要么将纯溶剂放置在流动相油藏中，要么将预混合的混合物通过所需的泵送装置输送到系统中。
低压混合
流动相组分在进入泵前在低压侧进行混合。比例电磁阀将单个溶剂输送到混合室，混合液由下游的泵以恒定流速输送到色谱柱。
低压系统能够提供多达4种不同溶剂的组合。
高压混合
在高压模式下，单独的泵驱动每一种溶剂到混合室，在那里混合在更高的压力下进行，流动相混合随后被引导到塔。
居住容积的意义
停留体积是指从溶剂混合点到柱的起始点的物理体积。高压系统住卷从1.5 - 3.0毫升,混合后发生泵在低压混合系统混合泵前发生的所以住卷可以高达4.0毫升,它包括体积混合室和油管泵的重量。
在编程的过程中，最终的组成达到柱混合后，因为它必须跨越停留体积。在低压混合体系中延迟更大，因此早期洗脱峰的保留时间比晚期洗脱峰的保留时间长。这样的差别在等距分离中是微不足道的。
高压和低压混合
两种制度各有优势，不能说哪一种优于另一种。不过，不妨对这两个系统作一个简要的比较:
- 由于混合的热量组成可以不同的混合，但现在的软件提供校正功能。
- 在高压泵中使用多台泵意味着增加成本和更多的维护。
- 高压系统通常仅限于两种溶剂
- 高压混合提供精确的控制和可重复性的流动相组成高达0.1%
- 低压混合在开发工作中更有用，因为可以操作到第四系
- 在低压混合中，溶解气体的脱气会引起更多的问题，因此流动相的脱气是必不可少的
- 在高效液相色谱分析中，溶解气体的脱气会引起一些问题，随后的流动相脱气文章将简要讨论不同的脱气技术。
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