分配色谱-原理，程序，应用和类型
分割色谱法是色谱法的一种，由理查德·劳伦斯·米林顿·辛格和阿彻·马丁在20世纪40年代引入。
分配色谱法定义
分配色谱的定义是，它是一种主要用于将混合物中存在的组分分离成两个液相的技术，这两个液相分别是原始溶剂和在色谱中使用的溶剂涂层。
分配吸附色谱法
吸附层析法是另一种色谱，溶质(气体或液体)分子直接吸附在固定相的表面。
分配和吸附色谱:相似之处
- 这两种色谱法的原理相同
- 两者都用于化合物混合物的分离
- 两者都能分离气体、液体和固体这三个阶段的组分。
分配和吸附色谱:不同之处
| 分配色谱法 | 吸附层析法 |
| 分离是基于分区的 | 分离是基于吸附 |
| 固相萃取 | 液液萃取 |
| 固定相:液态 | 固定相:固体 |
分配色谱法原理
在配分色谱中，样品组分的分离是通过在两相之间分配组分的过程进行的，两相都以液体形式存在。在此过程中，固定相上被液体表面覆盖的非混溶固体表面处于流动相。
固定相固定液体表面，最终变成固定相。当流动相从固定相移开时，组分就被分离了。这种分离是由于分配系数的不同。
色谱分配系数
当流动相在任何一段时间内停止流动时，溶质在两相之间达到平衡分布。在每一相中，浓度由色谱中的分配系数给出，用表示K＝C年代/ C米
在这里，C年代代表固定相中溶质的浓度
C米代表流动相中溶质的浓度
C的单位年代和C米可能是不同的。
当溶质在两相中均匀分布时，则K = 1。
分配色谱法程序
为了简单理解配分色谱，我们在这里解释进行纸色谱的过程。
设备要求:
- 色谱jar
- 毛细管
- 固定相
- 流动相-氯仿、甲醇、丙酮或乙醇
步骤:
- 选择适当的开发类型-基于溶剂,混合性、纸的复杂性等，发展的类型选择。通常采用上升纸色谱法，因为它是一种简单的技术，而且色谱图得到得很快。
- 选择一个固定相-根据孔的大小和分析物的质量，选择滤纸(固定相)。
- 〇准备样品样品是通过在生产流动相过程中使用的适当溶剂溶解该组分制备的。
- 在纸上发现样品将样品混合物涂抹在滤纸上适当的位置。
- 开发色谱-在色谱瓶的帮助下，通过将纸张浸入溶剂或流动相来确定色谱图的显影。通过毛细管作用，流动相被允许流过测试样品。
- 纸张干燥和识别化合物-色谱图开发后，滤纸在空气干燥器的帮助下干燥。具有不同分子带的纸张可以在UV柜中进行研究。Rf值也算出来了。
分配色谱的类型
- 液-液色谱法:在这种分配色谱类型中，用一张吸附剂纸代替吸附柱。根据它们的微分迁移速度，对各分量进行了划分。为了使色谱图可见，分离后要对它们进行染色。
- 气液色谱法:这也被称为气液分配色谱(GLPC)或气相色谱。在这种气液分配色谱中，样品混合物的分离是由惰性气体用管进行的。管子的填充物是用被涂上非挥发油的精细分离的惰性固体完成的。根据其在油中的溶解度和蒸气压所决定的速率，各组分都发生迁移。
分配色谱法的应用
- 分离和检测包括颜料在内的混合颜色
- 分离和测定蛋白质、脂类、生物碱、糖苷和其他生物分子
- 分离和检测氨基酸和碳水化合物
- 检验药品的纯度
- 在DNA / RNA序列
- 测定食品和饮料中的污染物
- 分离极性和非极性化合物
来源:
反应