观察微生物
第1部分-显微镜
微生物学研究肉眼看不清的微生物。观察微生物是微生物学不可分割的一部分。考虑到待研究对象的性质，显微镜成为最重要的仪器。
在显微镜的帮助下观察和研究微生物。用于测量微生物的测量单位是公制系统。样本的大小确定哪些显微镜可有效地查看样本。现代显微镜具有透明度的图像，放大率为10到数千次。
显微镜类型
简易显微镜
简单的显微镜只有一个透镜，就像放大镜。它有一个短焦距的双凸透镜。这类仪器的例子包括手镜和阅读镜。
当一个物体被保持在透镜附近时，它的主焦点就会产生一个像，这个像竖立起来并且比原物体大。列文虎克的简易显微镜可以将图像从100倍放大到300倍。
复合光学显微镜
这些是最基本的类型微生物学中使用的显微镜。它由一系列利用可见光作为光源的透镜组成。各种小标本可以研究到找到用复合光学显微镜观察细节。
在复合光学显微镜中，光线来自光源并通过聚光镜，将光线直接照射到标本上。然后光线进入物镜，进一步放大图像。
复合显微镜的组成
复合显微镜的主要部件有：
框架：基本框架结构由金属制成，包括臂和底座，整个放大和光学元件都附着在臂和底座上。金属臂连接到一个U形坚固的底座，该底座为仪器提供稳定性。
阶段：这是一个平的水平平台，位于显微镜长度的一半左右，在中心有一个孔，允许光线通过以照亮样品。
焦点旋钮：两对旋钮连接到臂上，有助于阶段的上下运动，调整和聚焦不同厚度的标本。
镜头系统：所有的显微镜都采用一套不同类型的透镜系统:望远镜、物镜和聚光镜，它们具有不同的聚焦能力，有助于形成完整的放大系统。
鼻罩：保持目标的旋转鼻梁筒附接到显微镜臂的弯曲上部。鼻梁架可以旋转，以将物镜定位在放大系统的路径中，在主体组件和眼件下方的所需放大率。
目镜(接目镜):目镜或眼镜透镜是一组透镜，其保持在护身符的圆柱形管中，在臂上的弯曲上部的管状结构上插入鼻部。它由两个或多个镜头集中在眼睛中。最新的显微镜由一对眼部组成，允许观察者使用眼睛在显微镜中观察样本。这种显微镜称为双目显微镜。通常使用的眼部有2倍，50倍和10倍放大率。
目标：物镜通常是小的圆柱形物体，包含一个或一组附在机头上的透镜。机头可容纳三到五个物镜，其中包含不同放大率（2X-400 X）的透镜。透镜的总排列是近焦的，这意味着即使在显微镜中透镜从一个更换到另一个，样品仍保持在焦点上。
冷凝器：聚光镜也是一个固定在舞台下面的透镜，它将来自光源的光束聚焦到幻灯片上。冷凝器通常借助于隔膜和/或过滤器来控制和管理通过样品的光的质量和强度。
光源：光源安装在显微镜的底座上。光源可以是日光灯、卤素灯，甚至是最新显微镜中使用的LED和激光器。显微镜有一些规定，可以通过中性密度滤光片降低光强度。
复合显微镜的类型
- 亮场显微镜–它是所有光学显微镜照明中最简单的一种。它有助于在明亮的背景下看到黑暗的物体。
- 暗场显微镜–这用于检查Live或未染色的微生物和其他样本，如光敏生物或样本，缺乏与背景形成对比的样本。
- 相差显微镜–它是有用的活体标本，不需要固定或染色，因为它可以杀死或不适的活微生物，将使观察不准确。
- 差分干扰对比显微镜–这种显微镜技术利用了活细胞和透明标本不同部分的光折射差异，使它们在显微镜下可以被观察到。
- 荧光显微镜–这种显微镜用紫外光放大荧光物质。它们能吸收紫外线并发出可见光。有时细胞也用荧光化学物质(荧光色素)染色，在显微镜下进行研究。
- 共焦显微镜–共焦显微镜主要用于研究细胞内特定物体的详细结构。
- 双光子显微镜–也被称为双光子激光扫描显微镜，它是精密荧光显微镜的进一步细化。
- 电子显微镜–它使用电子、电磁透镜和荧光屏。电子波长比可见光波长小100000 x，这有助于放大样品。在这里，用重金属盐对样本进行染色，以便观察.
所有这些类型的显微镜都能产生独特的图像和用于不同类型的观察微生物。
我们如何观察微生物？
常规染色微生物细胞用于清晰的显微镜检查。因此，染色是显微镜和微生物学的辅助技术，以增强微生物的显微图像中的对比度。今天可以使用不同类型的污渍和染色程序来研究各种微生物的多种性质。
不同染色程序中使用的染色剂是称为染料的化学物质的水溶液或酒精溶液，可能是天然的或合成的。这些污渍附着在细胞上，赋予细胞颜色和对比度，使细胞更加可见。污渍可能是酸性、碱性或中性。
酸性染料作为野酸，酸性浓血清，曙红等，染色本质上是基本的细胞的细胞质组分，而基本染料作为亚甲基蓝色，晶体紫，野生素等，染色细胞的酸性组分核酸。由于细菌细胞在其中性pH（pH7）的表面上略微负荷（pH7），因此碱性染料整体染色细菌细胞。
基本染色过程包括将样品固定或安装在载玻片上，将样品浸泡在染料溶液中一段时间，然后在显微镜下冲洗和观察样品。
在一些染色方法中，将额外的化学品含有额外的化学品加入到染色中，该染色剂增加了细胞与形成不溶性颜色沉淀物之间的染料的相互作用，其即使在从细胞中洗去后也被保留。基本上有两种类型的染色程序，简单差异。
简单染色
简单的染色是以确定细胞形状，大小和细菌细胞的布置的最基本染色。该染色技术染色细菌细胞。它可以用具有不同暴露时间的基本染料进行。
阴性染色也是一种简单的染色技术，它提供了获取细胞形状、细胞破碎和细胞内折射包涵体（如硫和聚β-羟基丁酸酯颗粒和内孢子）信息的最简单且可能是最快的技术。
细菌在阴性染色中对彩色背景作出无色。在阴性染色中使用的染料通常是阴离子的本质上，因此通过带负电的细胞质排斥，使细胞未存在。
微分染色
差异染色是一个广泛的术语，用于描述使用多种化学染色的染色过程。鉴别染色需要用途一系列染料基于结构和组成差异来染色不同的细胞细胞器。
这种染色有助于识别和分类细胞到不同的组。各种微分染色技术用于微生物研究
- 克染色–克染色是一种用于区分两组大群基于其不同的细胞壁成分的常用技术。该过程通过着色红色或紫色，通过着色细胞来区分革兰氏阳性和革兰氏阴性群。
- 酸速染色–它是一种用于鉴定酸快生物的差异污渍。酸快的生物体的特征在于几乎不可渗透的细胞壁，因为它们含有氰酸和大量的脂肪酸，蜡和复杂的脂质。随着细胞壁对大多数化合物抗性，酸快微生物需要特殊的染色技术。
- 内芽孢染色–它是用于可视化细菌性肠孢子的差异污渍，这对细菌来说是非常重要的，因为它们有助于在任何敌对状态下存活。
- 荚膜染色–这种类型的染色使用酸性和基本染料来染色背景和细菌细胞，使得胶囊的存在很容易被视为。
- 鞭毛染色–这些染色剂主要用于在鞭毛表面涂上染料或金属，如银。
- 细胞壁染色–将细菌细胞壁涂抹在载玻片上的水中，空气干燥后，用1%新品红水溶液染色3-4分钟。
- 核材料染色–核染色仅指细胞核染色。细胞核含有大量的核酸，因此在这种染色中使用了一种与核酸结合的试剂。
指出,记住:
- 微生物体积极小，肉眼看不见，因此用显微镜来观察和研究。
- 复合显微镜是研究微生物的常用仪器。他们使用玻璃透镜弯曲和聚焦光线，产生放大的小物体图像。
- 在任何学术或研究机构中，显微镜都是精密而昂贵的仪器。即使是最基本的化合物显微镜需要很多投资。因此，他们需要在使用和处理中进行重大关注。
- 染色是一种粘附在微生物的结构中的化学品，并且其效果染色微生物，因此在显微镜下可以容易地看到微生物。
- 碱性染色如亚甲基蓝、结晶紫、藏红花素、孔雀石绿等均为阳离子，具有较好的染色效果肯定的给许多细菌的染色体和细胞膜充电并染色。
- 酸污渍作为曙红和苦味酸是阴离子的，具有负电荷和染色细胞质和细胞器或夹杂物。
- 鉴别染色剂由两种或两种以上的染料组成，用于鉴定细菌。
- 最常用的细菌鉴别染色法是革兰氏染色法、Ziehl-Nielsen抗酸染色法和内生孢子染色法。
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