在高效液相色谱系统的顺利运行中,预防性维护的重要作用

在高效液相色谱系统的顺利运行中,预防性维护的重要作用
在高效液相色谱系统的顺利运行中,预防性维护的重要作用
高效液相色谱手册注射器

摘要预防维修是实验室仪器无故障运行的关键。对于那些需要24小时工作的仪器来说,这就更加重要了。高效液相色谱法是一种有望在商业测试实验室和工业中持续运行的仪器。

在制药和食品制造行业,需要对产品质量进行定期监测,系统需要满足在线质量控制的要求。万一出现问题,对产品质量的决定将会延迟。参与临床试验或研发活动的实验室也是如此。

高效液相色谱的无故障运行可以确保彻底的定期维护计划。可能不可能每天遵循这样的时间表,但如果每周或定期进行,它们可能会大大增加对样品的分析,并损失宝贵的时间。

本文涵盖了即使系统运行没有问题,也可以研究的一些重要领域。

流动相

流动相是您高效液相色谱的生命线

  • 使用高纯溶剂、水和试剂进行流动相制备
  • 过滤流动相在真空下使用0.22/0.45μ大小的过滤器去除固体悬浮物,如果有
  • 在流动相容器中使用在线过滤器,以确保没有固体悬浮颗粒到达色谱柱
  • 流动相应始终通过超声、氦气或在线脱气(如果可用)来去除溶解的空气
  • 当流动相发生变化时,从储液罐中取出入口过滤器,放入新的流动相,打开清洗阀,将先前的流动相完全清除出流水线。关闭阀门,让流动相通过进样器并冲洗。最后连接到柱上,用新的流动相清洗
  • 使用与前一流动相和下一流动相均可混溶的洗涤液,如异丙醇。最后用新流动相代替中间洗涤液
  • 用HPLC级水冲洗缓冲液。缓冲液的使用会导致结晶沉积。盐分会损坏柱塞或密封,缩短柱的使用寿命。

样品制备

  • 在转移到类似极性的溶剂之前,检查样品在流动相中的溶解度
  • 优化注射浓度,防止柱超载
  • 注射前使用0.22/0.45μ大小的过滤器过滤样品

高效液相色谱柱是昂贵的,如果你在使用和存储方面采取预防措施,你应该从他们得到长期服务

  • 始终避免对列重载。对于分析柱,样品载荷不应超过500 μg。
  • 避免操作条件如压力、流量等的突然变化
  • 总是选择警卫队列为了保护列,在更改列时更改为推荐的保护列
  • 在一天结束的时候,记得要清洗柱子
  • 如果列从系统中取出,一定要记得固定端盖
  • 在存储之前,清除固体盐沉积和缓冲液,长期存储时,应将柱存放在制造商推荐的溶剂中,并关闭端盖
  • 在pH值范围2-8内使用色谱柱,因为在这个范围外色谱柱开始恶化得更快

  • 在推荐的流量和压力范围内操作系统,以防止损坏泵的密封圈和o形环
  • 当泵不运行时,不要将腐蚀性溶剂或缓冲液留在系统中
  • 根据供应商的建议定期更换密封圈和o型圈。定期对进口过滤器进行超声波处理,以防止任何悬浮颗粒堵塞色谱柱
  • 带流动相的主泵清除早期分析成分的残留物
  • 在使用缓冲溶液作为流动相后,运行足够量的水以去除任何盐沉积

注射器

  • 用流动相冲洗注入器,以消除记忆效应,并消除相关的杂质峰
  • 中间用异丙醇冲洗
  • 使用手动进样器时,只有在进样时才保持进样器在负载位置
  • 冲洗自动注射系统,用水/异丙醇清洗针头,去除以前的样品污染

探测器

  • 检测器单元的残留物可以用流动的水清洗
  • 不要超过建议的压力限制,以避免损坏探测器细胞壁

柱温箱

柱式炉保持恒定的温度,防止漂移的保留时间的高峰。设定温度应保持在供应商推荐的范围内。保持烘箱清洁,定期检查各连接处,确保烘箱内气流无堵塞。

一个维护良好的高效液相色谱系统将为连续操作提供无故障操作,从而避免故障,并有助于保持您的高样品分析吞吐量。

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