选择高效液相色谱溶剂的关键考虑

用作流动相的溶剂的选择高效液相色谱法分析是方法开发的关键组成部分。不可能有一种通用的溶剂可以满足所有的应用，通常情况下，溶剂的组合是根据分析要求来决定的。选择合适的溶剂是基于它们的物理性质和与样品和柱固定相的相容性。

本文讨论了在决定溶剂作为流动相的适宜性中起重要作用的一些基本因素。

成本

成本是一个重要的考虑因素，因为高效液相色谱需要高纯度的溶剂，而且在大型实验室经常看到几十种高效液相色谱系统昼夜不停地工作。这意味着大量消耗高等级溶剂，因此成本考虑起着至关重要的作用。

溶解度

样品在流动相中应完全溶解。最轻微的不溶性将导致相分离或悬浮，这将导致操作问题。

吸光度

通常HPLC中使用的检测器是基于样品成分的光吸收。流动相组分在选定波长范围内的本征吸光度不应干扰样品的吸光度。理想情况下，流动相溶剂在感兴趣的波长处没有吸光度。

波动

流动相溶剂应具有低挥发性，特别是用于光散射检测器。高挥发性溶剂会导致成分的变化流动相组合大于使用和存储。这可能导致色谱图的重现性差。

粘度

所选择的溶剂应具有低粘度，以便在柱内流动时不会产生高背压。

惰性

所选溶剂对样品组分、色谱柱填料和色谱柱材料应具有惰性。任何与这些组分的反应都可能导致沉淀、气体或其他反应产物的形成，从而破坏系统的性能。溶剂与样品接触时不应形成分离相。换句话说，溶剂应该完全混溶。

水

水与其他溶剂结合或作为缓冲介质，也是反相流动相组成的重要组成部分。水净化系统已经商业化。这种系统产生的水应尽早使用，以便其质量在储存期间不会下降。

高效液相色谱技术对到达检测器的流动相组成变化高度敏感，因此必须通过0.45μm过滤器过滤溶剂以去除任何固体悬浮液。除气也是去除任何可能导致气流限制或假峰的溶解空气的基本要求。