如何在HPLC分析之前解除生物液？

脱蛋白化有助于不断扩大的范围HPLC.生物液体分析。HPLC分析前的样品过滤。样品过滤在液相色谱分析中的重要性强烈建议延长柱寿命，降低维护成本，从而有助于提高实验室吞吐量。

除了过滤之外，脱蛋白化对于分析生物液体，例如血浆，血清，尿液和脑脊液，抗生素水平，残留的农药和精神药物。蛋白质需要沉淀并从样品中除去，否则这些可能有助于柱性能的恶化

脱蛋白化技巧

变性-加热denatures most proteins and after heating denatured particles are centrifuged and removed.

Chemical precipitation –随着温度敏感化合物的加热比加热更有效，可以在加热过程中劣化。用三氯乙酸，离心和用氢氧化钠中和中和酸化除去99％的蛋白质。也可以使用氯乙酸。酸两种缺点都有一些缺点。三氯乙酸强烈吸收230nm，而氯乙酸在溶液中留下盐，其可以用有机溶剂沉淀或有助于UV检测器的基线噪声

Acetonitrile treatment– acetonitrile is a common solvent transparent below 190 nm. Mixing and centrifugation of plasma sample and acetonitrile will lead to precipitation of about 95% of proteins. Non-polar proteins such as albumins remain in liquid phase. The supernatant can be injected directly if a guard column is used to remove the balance 5% of the proteins. On long-term use, the guard column will need to be replaced or inverted and washed out to prevent the proteins from entering the main column.

在线脱蛋白化

通常，在加入酸或有机溶剂后，通过在离心后进行离心量是足够的。然而，为了节省时间自动的在线脱蛋白是可取的。一些仪器供应商提供专用配件，主要包括预处理柱：用亲水性聚合物涂层包装。预留大分子蛋白质，而分析物将导致主柱。

我们已经看到，脱蛋白化已经扩展了HPLC分离的生物流体的应用，这些生物流体是复杂的矩阵，并且在这种流体上的HPLC估计如果不是不可能使用该技术，这种流体将难以困难。

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