HPLC的一般应用基于溶质 - 静止相互作用分类
HPLC.已根据流动阶段和静止阶段的溶质之间的相互作用分为四类。在正常相位,反相,离子交换和尺寸排阻色谱中的情况下讨论了HPLC技术的分类已经简要讨论过HPLC的免费课程。本文将在每个类中涵盖一些主要应用类型。
正常相色谱
固定相是基于二氧化硅的,并用极性组覆盖。移动阶段是非极性的。分离分子的洗脱顺序是非极性,然后是弱极性和最终极性分子。
- 正态相色谱法将轴承不同官能团的化合物与基于大多数极性组的保留相比,轴承不同的官能团。保留条件下降:
羧酸>氨基胺>醇>酮>醛>醚>芳烃>烯烃>饱和碳氢化合物
- 异构体的分离
亲水化合物保留在固定极相上,并与疏水化合物分离。
反相色谱法
大多数申请都在制药,生命科学,食品工业等中覆盖了反相分离。基于惰性二氧化硅的固定相被非极性分子覆盖。最流行的填充基于共价结合的十二烷基二氧化硅(ODS-C 18),然后是辛基(C8)和己基(C6)基团。流动阶段比固定阶段更偏振。以增加疏水性或降低极性的顺序洗脱溶质分子。
离子交换色谱
离子交换色谱法由二氧化硅载体组成,其中固定带电的阴离子或阳离子基团以保留来自流动相的相反带电分子。季盐是强壮的,胺是弱阴离子交换剂,而磺酸和羧酸是弱阳离子交换剂。
该技术主要用于将来自蛋白质,药物和代谢物等混合物的纯化合物免受生物流体,例如血液和尿液,从组织中提取酶和有机酸和碱性化合物的混合物的分离。
尺寸排除色谱法
这类色谱分离在一种意义上是独一无二的,即分离不是基于洗脱化合物和固定相之间的化学相互作用。相反,它基于洗脱分子的分子大小差异及其渗透固定相的孔的能力。首先洗脱较大的分子,然后被捕获在固定相的孔中并稍后洗脱。
凝胶过滤色谱法用于水溶性聚合物的分馏。凝胶渗透色谱更常用于有机可溶性聚合物的分子量分布的分析。
本文为不同的HPLC技术提供了短暂暴露于应用领域。该领域永远扩展,在药品,生物技术,食品,食品,取证等领域,柱技术和自动化的进步可以发现更多的应用对HPLC分析的范围产生了重大贡献,并且应用数量正在增长现象率。
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