离子对色谱-一个可行的选择分离高极性分子的反相高效液相色谱

离子对色谱用普遍的反相色谱有助于分离带电的分析物。离子对试剂增强峰值形状和保留时间，当改变流动相比或改变固定阶段并不多大帮助。

这项技术是戈登·希尔博士在1973年发明的。离子对试剂在非极性链的末端有一个离子端官能团。将试剂加入流动相，并给予足够的时间与色谱柱平衡。链的非极性端与非极性固定相紧密相连，而带电荷的端伸入流动相。流动相中电荷相反的离子粒子被试剂上的电荷固定，导致样本分子和试剂之间的中性离子配对。这有助于选择性保留电荷的分析物在反相高效液相色谱法．

离子交换色谱已存在多年，但离子对色谱的引入提供了以下几个优点:

• 缓冲液的简单制备
• 广泛选择碳链长度，以改善保留和分离
• 显著减少分离时间
• 同时分离电离和非离子化分子
• 结果重现性高
• 改善峰形状

通过向流动相中加入氯化铵铵盐如四丁基氯化铵进行酸性样品进行酸性样品

\(RCOO ^- +R ' _4N^+ \右tarrow RCOONR ' _4\)

类似地，可以使用诸如烷基磺酸的带负电荷的试剂来选择性地保持带正电荷的离子碱基

\(RNH_3^+ + R ' so_3 ^- \右箭头RNH_3O_3S-R ' \)

离子对试剂使用注意事项:

• 选择的离子对试剂应缺乏紫外或荧光波长区域的吸收选择分析
• 在使用离子对试剂时，应精确地控制流动相组合物和温度。在使用离子对试剂时，排除了梯度洗脱
• 留出足够的时间让流动相与色谱柱平衡，使流动相或温度的变化最小化
• 与离子对试剂一起使用的色谱柱应该专门用于这种分析，因为即使经过大量的冲洗，也很难完全冲洗出离子对试剂

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